Điểm nổi bật
- Kỹ thuật tưới máu máy hạ thân nhiệt có oxy (Hypothermic Oxygenated Perfusion, HOPE) và tưới máu máy ở nhiệt độ cơ thể (normothermic machine perfusion, NMP) làm giảm hoạt hóa miễn dịch bẩm sinh do bạch cầu trung tính chi phối sau ghép gan.
- Cả HOPE và NMP đều làm giảm các dấu ấn tiền viêm và phân tử bám dính trên các tế bào dòng tủy xâm nhập vào mảnh ghép, qua đó hạn chế tổn thương thiếu máu cục bộ – tái tưới máu (ischaemia-reperfusion injury, IRI) giai đoạn sớm.
- HOPE đặc biệt giúp bình thường hóa nhanh hơn quần thể tế bào giết tự nhiên (natural killer, NK) và tế bào T ngoại vi, đồng thời làm giảm số lượng bạch cầu trung tính toàn thân, tương quan với mức độ tổn thương gan thấp hơn.
- Tưới máu máy làm tăng biểu hiện các điểm kiểm soát miễn dịch ức chế sau phẫu thuật, thúc đẩy điều hòa miễn dịch và có thể cải thiện kết cục của mảnh ghép.
Bối cảnh nghiên cứu
Ghép gan vẫn là một phương pháp điều trị then chốt đối với bệnh gan giai đoạn cuối, nhưng tổn thương thiếu máu cục bộ – tái tưới máu (IRI) do các cơ chế trung gian miễn dịch khởi phát có thể làm suy giảm chức năng mảnh ghép và kết cục của người bệnh. IRI liên quan đến sự hoạt hóa các tế bào miễn dịch bẩm sinh, đặc biệt là bạch cầu trung tính và tế bào dòng tủy, dẫn đến viêm và tổn thương mô. Bảo quản lạnh tĩnh (static cold storage, SCS) truyền thống giúp bảo tồn gan hiến ở nhiệt độ hạ thân nhiệt nhưng không thể ngăn hoàn toàn IRI. Gần đây, các kỹ thuật tưới máu máy như tưới máu oxy hóa hạ thân nhiệt (HOPE) và tưới máu máy ở nhiệt độ cơ thể (NMP) đã được phát triển và cho thấy triển vọng trong cải thiện chất lượng bảo quản cũng như kết cục lâm sàng. Tuy nhiên, tác động miễn dịch học chính xác của các chiến lược tưới máu này lên miễn dịch tại gan và toàn thân ở ghép gan người vẫn chưa được làm sáng tỏ đầy đủ.
Thiết kế nghiên cứu
Nghiên cứu cơ chế phụ này được thực hiện trong khuôn khổ thử nghiệm ngẫu nhiên có đối chứng HOPE-NMP (NCT04644744). Nghiên cứu tuyển 47 người nhận gan từ người hiến theo tiêu chuẩn mở rộng, lấy từ người hiến chết não. Người tham gia được phân ngẫu nhiên để nhận gan hiến được bảo quản bằng một trong ba phương pháp: bảo quản lạnh tĩnh quy ước (SCS), tưới máu máy oxy hóa hạ thân nhiệt cuối giai đoạn thiếu máu cục bộ (HOPE), hoặc tưới máu máy ở nhiệt độ cơ thể cuối giai đoạn thiếu máu cục bộ (NMP). Sinh thiết gan được thực hiện khi cơ quan tới nơi và trong giai đoạn sớm của IRI để ghi nhận các thay đổi miễn dịch tại chỗ. Tình trạng miễn dịch toàn thân được đánh giá bằng mẫu máu ngoại vi thu trước phẫu thuật, trong lúc tái tưới máu, và sau phẫu thuật vào các ngày 1, 2, 3 và 7. Các phân tích miễn dịch học chuyên sâu bao gồm cytometry dòng chảy quang phổ, miễn dịch huỳnh quang đa kênh kèm phân tích không gian, định lượng cytokine, đo đặc tính sinh năng lượng của tế bào và khối phổ để mô tả chi tiết đặc điểm tế bào và phân tử.
Kết quả chính
Nghiên cứu ghi nhận một số tác động miễn dịch quan trọng của tưới máu máy đối với mảnh ghép gan và người nhận:
- Thâm nhiễm bạch cầu trung tính: Cả HOPE và NMP đều làm giảm đáng kể sự xâm nhập của bạch cầu trung tính vào gan trong giai đoạn sớm của IRI so với SCS. Sự giảm này xảy ra mà không làm thay đổi phân bố không gian của bạch cầu trung tính trong mô gan.
- Điều biến kiểu hình tế bào dòng tủy: Tưới máu máy gây ra các thay đổi kiểu hình ở tế bào dòng tủy xâm nhập mảnh ghép, đặc trưng bởi giảm biểu hiện các chất trung gian tiền viêm và các phân tử bám dính. Sự điều biến này có thể hạn chế thêm huy động tế bào miễn dịch và tổn thương viêm.
- Phục hồi lympho bào ngoại vi: Người nhận HOPE cho thấy sự bình thường hóa nhanh hơn của các phân nhóm lympho bào lưu hành, đặc biệt là tế bào NK và tế bào lympho T, song hành với sự giảm các dấu ấn tổn thương gan. Ngược lại, sự phục hồi lympho bào chậm hơn ở nhóm SCS và NMP.
- Số lượng bạch cầu trung tính toàn thân: Cả số lượng tuyệt đối và tương đối của bạch cầu trung tính toàn thân đều thấp hơn ở người nhận HOPE, gợi ý mức độ hoạt hóa miễn dịch bẩm sinh toàn thân giảm xuống.
- Hoạt hóa tế bào miễn dịch lưu hành: Tưới máu máy làm giảm hoạt hóa viêm của các tế bào dòng tủy ngoại vi và tế bào lympho bẩm sinh. Ngoài ra, sau phẫu thuật ghi nhận tăng biểu hiện các phân tử checkpoint miễn dịch ức chế, cho thấy xu hướng chuyển sang điều hòa miễn dịch và thúc đẩy dung nạp.
Tổng hợp lại, các kết quả này cho thấy HOPE và NMP điều biến khác biệt các đường dẫn miễn dịch bẩm sinh – viêm liên quan đến IRI trong ghép gan, làm giảm tổn thương mô do bạch cầu trung tính ở giai đoạn sớm đồng thời tăng cường các cơ chế điều hòa miễn dịch.
Bình luận chuyên gia
Nghiên cứu của Lurje và cộng sự tận dụng thiết kế ngẫu nhiên có đối chứng vững chắc, kết hợp với phân tích miễn dịch đa chiều, để cung cấp những hiểu biết cơ chế giá trị về cách các chiến lược tưới máu máy khác nhau ảnh hưởng đến sinh học miễn dịch trong ghép gan người. Việc giảm sớm thâm nhiễm bạch cầu trung tính và giảm biểu hiện các dấu ấn tiền viêm trên tế bào dòng tủy phù hợp với cải thiện kết cục lâm sàng đã được ghi nhận khi sử dụng bảo quản bằng tưới máu máy. Đáng chú ý, HOPE dường như đặc biệt hiệu quả trong việc thúc đẩy cân bằng miễn dịch toàn thân sau ghép.
Các hạn chế bao gồm cỡ mẫu tương đối nhỏ và việc tập trung vào gan từ người hiến theo tiêu chuẩn mở rộng, điều này có thể ảnh hưởng đến khả năng khái quát hóa đối với các mảnh ghép nguy cơ chuẩn. Ngoài ra, nghiên cứu phụ này chưa đánh giá kết cục miễn dịch và lâm sàng dài hạn. Tuy vậy, công trình này đã làm sáng tỏ những thay đổi quan trọng ở mức tế bào và phân tử làm nền tảng cho tác dụng bảo vệ của tưới máu máy ngoài cơ thể.
Về mặt cơ chế, điều kiện oxy hóa hạ thân nhiệt có thể bảo tồn chức năng ty thể một cách tối ưu, hạn chế các tín hiệu nguy hiểm thúc đẩy hoạt hóa miễn dịch bẩm sinh; trong khi điều kiện ở nhiệt độ cơ thể có thể duy trì hoạt động chuyển hóa tốt hơn nhưng với hồ sơ điều hòa miễn dịch khác nhau. Những tác động miễn dịch tinh vi này cần được nghiên cứu thêm để tối ưu hóa phác đồ tưới máu và các liệu pháp miễn dịch hỗ trợ.
Kết luận
Nghiên cứu tiên phong trên người này cho thấy các chiến lược tưới máu máy oxy hóa hạ thân nhiệt và tưới máu máy ở nhiệt độ cơ thể làm giảm đáng kể đáp ứng miễn dịch bẩm sinh và viêm sau ghép gan. Cả hai phương thức đều giảm tổn thương gan qua trung gian bạch cầu trung tính và thúc đẩy chuyển dịch sang các đường dẫn điều hòa miễn dịch, trong đó HOPE còn giúp phục hồi lympho bào toàn thân nhanh hơn. Những biến đổi miễn dịch này có khả năng góp phần vào cải thiện kết cục mảnh ghép và lâm sàng liên quan đến bảo quản bằng tưới máu máy. Các nghiên cứu tiếp theo nên tập trung vào hoàn thiện kỹ thuật tưới máu và tích hợp các liệu pháp nhắm đích miễn dịch nhằm nâng cao thành công ghép tạng và tiên lượng người bệnh.
Kinh phí và ClinicalTrials.gov
Nghiên cứu cơ chế phụ này được lồng ghép trong thử nghiệm ngẫu nhiên có đối chứng HOPE-NMP (mã định danh ClinicalTrials.gov: NCT04644744). Chi tiết kinh phí cụ thể không được công bố trong bài báo nguồn.
References
Lurje I, Horn P, Guillot A, Uluk D, Schliephake F, Rohm L, Liefke-Biegel DK, Lehnert M, Remih K, Hokamp R, Werner W, Bruneau A, Pein J, Shevchenko Y, Zhang IW, Kumar P, Engelmann C, Peiseler M, Eden J, Dutkowski P, Meierhofer D, Gaisa N, Strnad P, Pratschke J, Hammerich L, Tacke F, Lurje G. Hypothermic oxygenated and normothermic machine perfusion mitigate innate systemic and hepatic inflammation after liver transplantation. Gut. 2026 Sep 29. PMID: 42810848. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/42810848/
