揭示SRSF1-LCK剪接轴：免疫性血小板减少症中调节性T细胞受损的新机制

亮点

• 免疫性血小板减少症（immune thrombocytopenia，ITP）与T细胞受体（T-cell receptor，TCR）信号传导缺陷所介导的调节性T细胞（regulatory T-cell，Treg）功能受损相关。
• 对ITP患者CD4+初始T细胞进行RNA测序显示，存在异常的可变剪接，其中TCR信号传导中的关键激酶LCK出现显著的外显子8跳读。
• 剪接因子SRSF1可直接调控LCK外显子8的包含；其在ITP中的表达降低与Treg诱导受损相关。
• 功能研究提示，外显子8跳读型LCK会削弱TCR激活，降低FOXP3诱导和Treg分化，提示ITP中存在一种新的致病轴。

研究背景

免疫性血小板减少症（ITP）是一种常见的自身免疫性血液系统疾病，其特征为因抗体介导的血小板破坏以及巨核细胞生成缺陷而导致血小板计数降低。除血小板破坏外，T细胞免疫失调，尤其是调节性T细胞（Treg）功能减弱，也被认为参与ITP的发病机制。然而，将T细胞受体（TCR）信号传导缺陷与ITP中Treg发育受损联系起来的分子机制仍未完全阐明。这一知识空白阻碍了旨在恢复免疫耐受并改善疾病的靶向治疗创新。

研究设计

本研究分离ITP患者及健康对照者的CD4+初始T细胞，体外分析其TCR信号传导及Treg诱导能力。研究采用全面的RNA测序（RNA-seq）来描绘两组之间转录组和可变剪接差异。功能实验包括LCK minigene报告系统、RNA pull-down联合质谱以及RNA免疫沉淀，用于鉴定剪接调控因子。配套的细胞和小鼠模型用于评估特定LCK外显子跳读事件对Treg分化及活动性ITP状态下血小板计数的生物学影响。

主要发现

研究表明，与健康对照相比，ITP患者来源的CD4+初始T细胞对TCR信号的应答明显降低，且在体外向FOXP3+ Treg诱导的能力受损。转录组分析显示广泛的可变剪接失调，其中LCK外显子8跳读是最突出的异常之一。LCK编码一种酪氨酸激酶，是TCR近端信号传导和Treg发育的重要组成部分。

利用LCK minigene系统和RNA pull-down实验，鉴定出富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子1（serine/arginine-rich splicing factor 1，SRSF1）可直接调控LCK外显子8的包含。值得注意的是，ITP患者CD4+初始T细胞中SRSF1表达显著降低。恢复SRSF1表达可挽救外显子8的包含并改善体外Treg诱导，证明了二者之间的因果关系。

通过反义寡核苷酸介导抑制LCK上SRSF1结合位点，可在Jurkat T细胞中增强外显子8跳读，并导致TCR激活信号减弱。机制研究显示，外显子8跳读型LCK与ZAP70和CD3ζ链的结合能力下降，而这两者是将激活信号从TCR向下游传递的关键适配分子。该信号缺陷降低了FOXP3诱导，而FOXP3对Treg谱系决定至关重要。

与人类不同，小鼠Lck缺乏可导致外显子8跳读的相应剪接元件；然而，在活动性ITP模型中，将工程化表达外显子8跳读型Lck变体的鼠源CD4+初始T细胞 adoptive transfer 至CD61敲除小鼠后，可见Treg频率下降及血小板计数降低。这些体内数据进一步支持了LCK异常剪接在ITP中的致病相关性。

专家点评

本研究阐明了一个意想不到的调控轴，即剪接因子SRSF1与LCK可变剪接共同参与ITP中Treg诱导缺陷的形成。通过将RNA剪接改变与TCR信号受损及免疫耐受破坏联系起来，这些发现拓展了我们对ITP发病机制的认识，不再局限于经典的抗体介导血小板破坏。鉴定SRSF1为LCK剪接的调节因子，为恢复Treg功能和免疫稳态的治疗靶向提供了新的方向。

局限性包括依赖体外及小鼠模型来近似模拟人类疾病，以及异质性免疫细胞群中可变剪接调控的复杂性。此外，调控SRSF1或LCK剪接的临床意义仍需在更大队列和转化研究中验证。尽管如此，这些数据为进一步探索自身免疫病中的RNA基础治疗提供了有力依据。

结论

本研究揭示了ITP中Treg诱导受损的一种新的分子机制，其核心为SRSF1表达降低及随后发生的LCK外显子8跳读。由此引发的TCR信号缺陷削弱FOXP3表达和Treg发育，从而促进自身免疫性血小板破坏。旨在恢复SRSF1功能或纠正LCK剪接的治疗策略，可能成为重建ITP免疫耐受的创新方法。

未来研究应聚焦于在不同患者群体中验证这些发现，阐明更多参与其中的剪接因子，并开发具有治疗潜力的剪接调控干预措施，用于ITP及相关自身免疫性疾病。

资金支持与ClinicalTrials.gov

本研究未提及具体资助来源或临床试验注册信息。

参考文献

1. Hu X, Leng S, Liu Y, et al. Reduced SRSF1 expression correlates with LCK exon skipping and impaired Treg induction in immune thrombocytopenia. Blood. 2026;148(18):2239-2250. PMID: 42607060.
2. Zheng SG. Regulatory T-cell therapy in autoimmune diseases: opportunities and challenges. Immunology. 2021;162(2):131-140.
3. Smith-Garvin JE, Koretzky GA, Jordan MS. T cell activation. Annu Rev Immunol. 2009;27:591-619.
4. Fu XD, Ares M Jr. Context-dependent control of alternative splicing by RNA-binding proteins. Nat Rev Genet. 2014;15(10):689-701.
5. St–Laurant J, Barber DL. Kinases regulating T cell activation and memory development. Adv Exp Med Biol. 2015;850:35-59.