亮点
- 多重免疫荧光与空间转录组学的整合分析，有助于阐明DLBCL中的免疫细胞景观。
- 鉴定出一个CD163高／CD11c低的高风险肿瘤免疫微环境亚群，并与不良预后相关。
- 以CD163低／CD11c高免疫浸润为特征的低风险亚群，与较好的临床结局相关。
- 高风险患者可能从LAG3相关免疫检查点阻断中获益，低风险患者则可能适合CTLA4相关治疗策略，具有潜在治疗意义。
研究背景
弥漫大B细胞淋巴瘤（Diffuse Large B-Cell Lymphoma，DLBCL）是非霍奇金淋巴瘤中最常见的侵袭性亚型，其临床表现和预后具有显著异质性。尽管免疫化疗取得了进展，包括在CHOP（环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和泼尼松）方案中加入利妥昔单抗，但仍有多达40%的患者出现复发或难治性疾病。新近研究提示，肿瘤免疫微环境（tumor immune microenvironment，TIME）是决定DLBCL预后和治疗反应的关键因素。浸润的免疫细胞，如巨噬细胞和树突状细胞，可影响肿瘤生物学行为并调节免疫应答。然而，针对DLBCL内免疫细胞亚群的空间和分子特征，目前仍缺乏系统性研究，其预后价值及转化医学意义亦有待进一步明确。
研究设计
Johansson等在561例DLBCL患者样本的大型队列中，开展了多重免疫荧光（multiplex immunofluorescence，mIF）成像与空间引导转录组学相结合的整合研究。该方法可实现对免疫细胞和肿瘤细胞的高分辨率空间定量及分子分型。重点分析的免疫细胞群包括CD163阳性巨噬细胞、CD11c阳性树突状细胞，以及CD3阳性T细胞和CD20阳性恶性B细胞。研究采用机器学习分类器提高细胞密度定量的准确性。基因表达分析主要聚焦于免疫相关和肿瘤相关通路，以揭示与临床结局相关的潜在生物学差异。研究还验证了利用常规病理双重免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）染色技术识别免疫亚群的可行性。临床预后价值通过多变量模型进行评估，并在接受CHOP和R-CHOP方案治疗、且来自独立公开数据库的患者队列中得到验证。
主要发现
研究识别出两种具有不同预后意义的主要TIME亚群：
- CD163低／CD11c高亚群（低风险）：该亚群与良好预后相关。免疫特征显示CD11c阳性树突状细胞富集，而CD163阳性巨噬细胞浸润较少。值得注意的是，该TIME中免疫检查点分子CTLA4表达较高，提示其可能处于较为活跃的免疫监视环境中，具备调控抗肿瘤应答的潜力。
- CD163高／CD11c低亚群（高风险）：该亚群以CD163阳性巨噬细胞丰富为特征，提示存在M2样免疫抑制性巨噬细胞表型，同时CD11c阳性树突状细胞较少，并与较差的临床结局相关。转录组数据表明，M2型巨噬细胞标志物MRC1（甘露糖受体）、SIGLEC1和MARCO表达升高。此外，该TIME还表现出T细胞耗竭标志物，尤其是LAG3水平升高，提示其具有有利于肿瘤逃逸的免疫抑制性微环境。
重要的是，TIME亚群的预后意义独立于国际预后指数（International Prognostic Index，IPI）等已建立的临床病理风险因素。研究表明，在常规临床环境中，CD163与CD11c双重IHC染色可有效对患者进行分层，凸显其转化应用潜力。纳入这些标志物的多变量模型可成功预测接受CHOP和R-CHOP治疗的外部队列患者结局，进一步证明了该研究结果的稳健性和可重复性。
专家点评
该研究巧妙地结合前沿空间转录组学与多重成像技术，以前所未有的分辨率解析DLBCL中的TIME，并将分子表型与临床相关的预后分层相衔接。高风险CD163高／CD11c低亚群的识别，强化了M2样肿瘤相关巨噬细胞的不利作用；这类细胞越来越被认为是免疫抑制和化疗耐药的重要介导者。相较之下，CD11c高特征则与可能具有免疫刺激作用的树突状细胞存在相一致，从而促进更有效的抗肿瘤免疫。
不同亚群中CTLA4和LAG3等检查点分子的差异性表达，为个体化免疫检查点抑制治疗提供了有力依据。LAG3阻断可能有助于恢复高风险组中耗竭的T细胞功能，而靶向CTLA4则可能增强低风险组的抗肿瘤免疫。然而，仍需前瞻性临床试验来验证这些假设，并评估基于TIME分层的DLBCL亚群中的治疗疗效。
本研究的局限性包括：所分析免疫亚群内部可能存在异质性，以及组织取样具有横断面性质。此外，还需要功能性研究以准确界定这些免疫细胞表型影响淋巴瘤行为和治疗反应的机制通路。
结论
这项全面的空间转录组学分析定义了DLBCL中具有临床意义的免疫微环境亚群，其预后价值可独立于传统风险因素。研究证明，CD163阳性／CD11c阴性表型与免疫耗竭及不良结局相关，为基于生物标志物的治疗分层提供了依据。将CD163和CD11c双重IHC染色纳入常规病理评估，有望成为指导预后判断并进一步实现DLBCL个体化检查点免疫治疗的可行方法。未来研究应重点开展前瞻性验证，并探索针对这些由TIME定义的患者亚群的靶向免疫调节治疗。
资金来源与临床试验注册
原始发表未说明资金来源和临床试验注册信息。
参考文献
- Johansson A, Nilsson D, Wikström F, et al. Integrated spatially guided transcriptomics and multiplex imaging identify a high-risk CD163+/CD11c-subgroup in diffuse large B-cell lymphoma. Haematologica. 2026 Jul 23. PMID: 42489074.
- Scott DW, Gascoyne RD. The tumour microenvironment in B cell lymphomas. Nat Rev Cancer. 2014 Sep;14(9):517-34. doi: 10.1038/nrc3775.
- Havel JJ, Chowell D, Chan TA. The evolving landscape of biomarkers for checkpoint inhibitor immunotherapy. Nat Rev Cancer. 2019 Sep;19(3):133-150. doi: 10.1038/s41568-019-0116-x.
- Binnewies M, Roberts EW, Kersten K, et al. Understanding the tumor immune microenvironment (TIME) for effective therapy. Nat Med. 2018 May;24(5):541-550. doi: 10.1038/nm.2018.0014.