Nhấn mạnh
– Xác định AH001 là một chất ức chế mới của tín hiệu RhoA nhắm vào trục TRPV4-RhoA-RhoGDI1.
– Kỹ thuật điện tử lạnh tiết lộ rằng AH001 kết hợp với TRPV4 giữ RhoA ở trạng thái không hoạt động gắn GDP.
– AH001 giảm huyết áp và ngăn ngừa tái tạo mạch máu trong các mô hình động vật tăng huyết áp.
– Hiệu quả chống tăng huyết áp phụ thuộc vào biểu hiện TRPV4 và RhoGDI1 trong tế bào cơ trơn mạch máu.
Nền tảng nghiên cứu và gánh nặng bệnh tật
Tăng huyết áp vẫn là thách thức sức khỏe cộng đồng toàn cầu ảnh hưởng đến hơn một tỷ người và là yếu tố nguy cơ chính đối với bệnh tim mạch, đột quỵ và suy thận. Mặc dù có nhiều lớp thuốc chống tăng huyết áp, một phần đáng kể bệnh nhân vẫn gặp tình trạng kiểm soát huyết áp không đủ hoặc tác dụng phụ. Tế bào cơ trơn mạch máu (VSMCs) đóng vai trò quan trọng trong việc xác định độ co giãn và sức đề kháng mạch máu,直接影响全身血压。RhoA信号通路，由Rho家族小GTP酶介导，在VSMC收缩、细胞骨架动力学和表型调节中起关键作用。异常的RhoA激活导致持续的血管收缩和高血压中的血管重塑，使其成为一个有吸引力的治疗靶点。然而，当前的RhoA通路抑制剂面临选择性有限、效力低和药物开发可行性差等挑战。因此，迫切需要新的策略来更特异性和有效地抑制RhoA信号，以改善高血压的治疗效果。
研究设计
这项调查研究结合了结构生物学、分子生物学、细胞实验和动物模型，阐明了RhoA失活的新调控轴及其对高血压治疗的意义。使用冷冻电子显微镜（cryo-EM）、邻近连接分析（PLA）和定点突变技术，揭示了TRPV4、RhoA和RhoGDI1蛋白之间的相互作用以及小分子AH001的调控效应。从小鼠模型中培养的主要VSMC，以及包括Trpv4敲除（Trpv4-/-）和平滑肌特异性RhoGDI1敲除（Arhgdiaf/f Myh11-CREERT2）在内的基因工程小鼠，用于评估分子和生理反应。高血压模型，包括血管紧张素II（Ang II）诱导的高血压和自发性高血压大鼠（SHR），作为体内平台测试AH001的疗效。主要实验终点包括RhoA活性水平、VSMC收缩和表型转换、血压测量和血管重塑评估。
主要发现
该研究确定AH001 ((R)-1-(3-乙基苯基)乙烷-1,2-二醇)是一种独特的RhoA信号通路抑制剂，通过一种新机制发挥作用。与传统的直接靶向RhoA或其下游效应器的RhoA抑制剂不同，AH001通过调节TRPV4-RhoA-RhoGDI1轴将不活跃的RhoA-GDP形式隔离在细胞膜和细胞质中。
分子和结构见解：冷冻电镜显示，AH001结合到TRPV4，使其稳定在闭合构象。这种构象增强了TRPV4对RhoA的亲和力，使RhoA保持在其不活跃的GDP结合状态，促进其与RhoGDI1的结合。这个三元复合物有效减少了活跃的GTP结合RhoA的数量，从而减弱下游信号传导。定点突变证实了负责AH001增强TRPV4-RhoA相互作用的关键残基。PLA分析进一步验证了在AH001处理下TRPV4、RhoA和RhoGDI1之间增加的接近性。
细胞功能效应：在培养的VSMC中，AH001处理显著降低了RhoA活性，并相应地抑制了RhoA/ROCK/MYPT1/MLC信号通路。功能上，这转化为VSMC收缩减少，这是血管张力的关键决定因素。此外，AH001通过调节RhoA/ROCK/LIMK1/cofilin/MRTF-A/SRF信号级联抑制VSMC向成纤维细胞样细胞的病理性表型转换，这些细胞参与血管纤维化和重塑。TRPV4或RhoGDI1的敲低显著削弱了AH001的抑制效应，强调了这一轴在介导AH001作用中的重要性。
体内抗高血压疗效：在血管紧张素II诱导的高血压小鼠和自发性高血压大鼠中，AH001给药显著降低了急性期和慢性期的血压。它有效预防了血管重塑，显示出超出降压的保护性血管效应。值得注意的是，这些有益效应在Trpv4-/-和Arhgdiaf/f Myh11-CREERT2小鼠中被削弱，证实了完整的TRPV4和RhoGDI1表达在VSMC中对于AH001疗效的重要性。
综上所述，AH001代表了一种首创新分子，通过TRPV4-RhoA-RhoGDI1轴调节RhoA活性，具有比传统方法更高的特异性和功能性影响。
专家评论
AH001机制的发现为靶向Rho GTP酶增加了新的维度，历史上由于其对GTP/GDP的高亲和力和缺乏明显的药物口袋，Rho GTP酶被认为难以药物化。通过结合TRPV4，一个已知具有药理学可行性的阳离子通道，这种方法采用了一条间接但有效的途径来隔离不活跃的RhoA。这种方法可能克服了直接RhoA或ROCK抑制剂遇到的特异性和脱靶效应问题。
此外，AH001在抑制VSMC收缩和阻止适应不良的表型转换方面的双重作用不仅有望控制高血压，还可以减轻血管并发症如纤维化和重塑。这可能会转化为更好的长期心血管结果。
限制包括AH001在人类中的安全性和药代动力学尚未探索，长期调节TRPV4对其他生理系统的影响需要评估。此外，临床试验数据是确认可转化性的必要条件。尽管如此，机制的清晰性和强大的临床前疗效值得进一步开发。
结论
本研究阐明了通过TRPV4-RhoA-RhoGDI1轴调节RhoA信号传导的一个先前未被认识的调控机制，并引入了AH001作为利用这一途径的开创性抑制剂。通过TRPV4调节稳定不活跃RhoA的新策略为高血压管理提供了有希望的治疗途径，有可能提高特异性并减少脱靶效应。未来需要进行临床评估，以确定AH001或相关化合物在高血压患者中的安全性和有效性。更广泛地说，这些发现为在血管生物学及其他领域的Rho家族GTP酶靶向研究开辟了新的方向。
参考文献
Wang J, Yuan Z, Yu N, Jiao Q, Zhou H, Liao W, Shan J, Ruan S, Zhao Y, Mo Y, Qi L, Li T, Fu J, Ke B, Xu Y, Qian X, Zhang J, Zhao Z, Li S, Wang R, Li H. Inactivation of RhoA for Hypertension Treatment Through the TRPV4-RhoA-RhoGDI1 Axis. Circulation. 2025 Aug 26;152(8):519-536. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.124.071884. Epub 2025 Jun 16. PMID: 40518994.
